Klíčový rozdíl - průtoková cytometrie vs. FACS
V kontextu buněčné teorie jsou buňky základní strukturní a funkční jednotkou všech živých organismů. Třídění buněk je metodika, která se používá k oddělení různých buněk podle fyziologických a morfologických znaků. Mohou mít intracelulární nebo extracelulární vlastnosti. Interakce DNA, RNA a proteinů jsou považovány za intracelulární interaktivní vlastnosti, zatímco tvar, velikost a různé povrchové proteiny jsou považovány za extracelulární vlastnosti. V moderní vědě vedly metodiky třídění buněk k podpoře různých výzkumů v biologických studiích a také při zavádění nových principů prostřednictvím výzkumu medicíny. Třídění buněk se provádí na různých metodikách, které zahrnují jak primitivní s menším vybavením, tak pokročilé technologické metodiky s využitím sofistikovaných strojů. Hlavní metodikou je průtoková cytometrie, fluorescenční aktivované třídění buněk (FACS), magnetická selekce buněk a třídění jednotlivých buněk. Průtoková cytometrie a FACS jsou vyvinuty pro diferenciaci buněk podle jejich optických vlastností. FACS je specializovaný typ průtokové cytometrie. Průtoková cytometrie je metodika, která se používá při analýze heterogenní populace buněk podle různých molekul buněčného povrchu, velikosti a objemu, což umožňuje zkoumání jednotlivých buněk. FACS je proces, při kterém se směs vzorků buněk třídí podle jejich rozptylu světla a fluorescenčních charakteristik do dvou nebo více nádob. To je klíčový rozdíl mezi průtokovou cytometrií a FACS.
OBSAH
1. Přehled a klíčový rozdíl
2. Co je to průtoková cytometrie
3. Co je to FACS
4. Podobnosti mezi průtokovou cytometrií a FACS
5. Porovnání vedle sebe - průtoková cytometrie vs. FACS v tabulkové formě
6. Shrnutí
Co je to průtoková cytometrie?
Průtoková cytometrie je metoda, která se používá ke zkoumání a určování exprese intracelulárních molekul a buněčného povrchu ak definování a charakterizaci odlišných typů buněk. Používá se také při určování objemu a velikosti buněk a pro hodnocení čistoty subpopulací, které jsou izolovány. To umožňuje víceparametrické vyhodnocení jednotlivých buněk přibližně ve stejnou dobu. Průtoková cytometrie se používá k měření intenzity fluorescence, která se vytváří v důsledku fluorescenčně značených protilátek, které pomáhají identifikovat proteiny nebo ligandy, které se vážou k přidruženým buňkám.
Obrázek 01: Průtoková cytometrie
Průtoková cytometrie obecně zahrnuje tři podsystémy. Jsou to fluidika, elektronika a optika. V průtokové cytometrii je k dispozici pět hlavních složek, které se používají při třídění buněk. Jsou to průtoková cela (proud kapaliny, který se používá k jejich přepravě a vyrovnání článků pro proces optického snímání), systém měření (mohou to být různé systémy včetně rtuťových a xenonových výbojek, vysoce výkonných vodou chlazených nebo nízkoenergetické vzduchem chlazené lasery nebo diodové lasery), ADC; Analogově-digitální převodník, zesilovací systém a počítač pro analýzu. Akvizice je proces, při kterém jsou data odebírána ze vzorků pomocí průtokového cytometru. Tento proces je zprostředkován počítačem, který je spojen s průtokovým cytometrem. Software přítomný v počítači analyzuje informace dodávané do počítače z průtokového cytometru. Tento software má také schopnost upravovat parametry experimentu řídícího průtokový cytometr.
Co je FACS?
V kontextu průtokové cytometrie je fluorescenčně aktivované třídění buněk (FACS) metoda, která se používá při diferenciaci a třídění vzorku směsi biologických buněk. Buňky jsou odděleny od dvou nebo více kontejnerů. Metoda třídění je založena na fyzikálních vlastnostech buňky, která zahrnuje rozptyl světla a fluorescenční vlastnosti buňky. Jedná se o důležitou vědeckou techniku, kterou lze použít k získání spolehlivých kvantitativních a kvalitativních výsledků fluorescenčních signálů, které jsou emitovány z každé buňky. Během FACS zpočátku předem získaná směs buněk; suspenze je směrována do středu úzkého proudu kapaliny, který rychle proudí. Tok kapaliny je navržen tak, aby oddělil buňky v suspenzi na základě průměru každého článku. Na proud suspenze se aplikuje mechanismus vibrací, který vede k tvorbě jednotlivých kapiček.
Obrázek 02: FACS
Systém je kalibrován, aby vytvořil jednu kapičku s jednou buňkou. Těsně před vytvořením kapiček se průtoková suspenze pohybuje podél zařízení pro měření fluorescence, které detekuje fluorescenční charakteristiku každé buňky. V místě tvorby kapiček se umístí elektrický nabíjecí prstenec, kterým se náboj indukuje do kruhu před měřením intenzity fluorescence. Jakmile jsou kapičky vytvořeny z proudu suspenze, uvnitř kapiček je zachycen náboj, který poté vstupuje do elektrostatického vychylovacího systému. Podle náplně systém odvádí kapičky do různých nádob. Způsob aplikace poplatku se liší podle různých systémů používaných ve FACS. Zařízení používané ve FACS je známé jako třídič buněk aktivovaný fluorescencí.
Jaká je podobnost mezi průtokovou cytometrií a FACS?
Průtoková cytometrie a FACS jsou vyvinuty pro diferenciaci buněk podle jejich optických vlastností
Jaký je rozdíl mezi průtokovou cytometrií a FACS?
Rozdílný článek uprostřed před tabulkou
Průtoková cytometrie vs. FACS |
|
| Průtoková cytometrie je metodika, která se používá při analýze heterogenní populace buněk podle různých molekul buněčného povrchu, velikosti a objemu, což umožňuje vyšetřování jednotlivých buněk. | FACS je proces, při kterém se směs vzorků buněk třídí podle jejich rozptylu světla a fluorescenčních charakteristik do dvou nebo více nádob. |
Shrnutí - Flow Cytometry vs FACS
Buňka je základní strukturní a funkční jednotkou všech živých organismů. Třídění buněk je proces, při kterém jsou buňky izolovány a diferencovány do různých kategorií na základě jejich intracelulárních a extracelulárních vlastností. Průtoková cytometrie a FACS jsou dvě důležité metodiky při třídění buněk. Oba procesy jsou vyvinuty pro rozlišení buněk podle jejich optických vlastností. Průtoková cytometrie je metodika, která se používá při analýze heterogenní populace buněk podle různých molekul buněčného povrchu, velikosti a objemu, což umožňuje zkoumání jednotlivých buněk. FACS je proces, při kterém se směs vzorků buněk třídí podle jejich rozptylu světla a fluorescenčních charakteristik do dvou nebo více nádob. To je rozdíl mezi průtokovou cytometrií a FACS.
Stáhněte si verzi Flow Cytometry vs. FACS ve formátu PDF
Můžete si stáhnout verzi tohoto článku ve formátu PDF a použít jej pro offline účely podle citace. Stáhněte si zde verzi PDF. Rozdíl mezi průtokovou cytometrií a FACS
