Klíčový rozdíl - transformanti vs rekombinanti
Rekombinace a transformace jsou dva klíčové kroky v genetickém inženýrství, kde jsou vlastnosti organismu záměrně modifikovány manipulací s jeho genetickým materiálem. Rekombinace je proces, při kterém se cizí DNA inkorporuje do vektorového genomu a vytvoří se molekula rekombinantní DNA. Transformace je dalším krokem, ve kterém je rekombinantní molekula zadána do hostitelského organismu. Hostitelská buňka nebo organismus usnadňuje expresi rekombinantní molekuly. Klíčovým rozdílem mezi transformanty a rekombinanty je to, že transformanty jsou buňky nebo organismy, které přijímají rekombinantní molekulu uvnitř a usnadňují expresi, zatímco rekombinanty jsou vektory, které umožňují inzerci cizí DNA do jejího genomu a transport do hostitelských transformantů pro expresi.
OBSAH
1. Přehled a klíčový rozdíl
2. Co jsou transformanty
3. Co jsou rekombinanty
4. Porovnání vedle sebe - transformanti vs. rekombinanti
5. Shrnutí
Co jsou transformanti?
Transformanty jsou buňky nebo organismy, ve kterých je rekombinantní DNA absorbována pro expresi. Bakterie se běžně používají jako hostitelské organismy v genetickém inženýrství, protože se v laboratorních podmínkách snadno pěstují, množí a manipulují a transformační proces je snadný ve srovnání s jinými organismy. Nejoblíbenější hostitelskou bakterií používanou v genetickém inženýrství je bakterie E. coli.
Během procesu transformace jsou hostitelské buňky indukovány, aby přijímaly rekombinanty. Některé hostitelské buňky však rekombinantní molekuly nepřijímají. Jsou známé jako netransformanty a buňky, které uvnitř obsahují molekuly rekombinantní DNA, jsou známé jako transformanty. Výběr transformantů z netransformantů se provádí pomocí selektovatelných markerů v molekulární biologii. Selekční markery jsou vloženy do vektorového genomu společně s DNA inzertem. Běžně používané selektovatelné markery jsou geny rezistentní na antibiotika. Markerové geny usnadňují diferenciaci transformantů a pokračují v procesu. Po transformačním procesu se bakterie pěstují v médiu obsahujícím antibiotika. Pouze transformanty jsou schopné růst na tomto médiu, protože uvnitř mají rekombinanty.
Jakmile je molekula rekombinantní DNA transformována uvnitř hostitelského organismu, může být cizí DNA buď integrována do genomu hostitelské buňky, nebo zůstat neintegrovaná v cytoplazmě. Exprese a replikace cizí DNA se však vyskytují v hostitelském organismu a produkují požadovaný výsledek procesu.
Co jsou rekombinanty?
Rekombinantní je organismus nebo buňka, která má rekombinovaný genom obsahující cizí DNA. Rekombinanty jsou výsledkem procesu genetického inženýrství. Jsou uměle konstruovány in vitro vložením požadovaných genů a úpravou genomu. Bakteriální plazmidy a bakteriofágy často působí jako rekombinanty v genetickém inženýrství. Má chiméru různých DNA. Rekombinantní molekula DNA přenáší cizí DNA do hostitelského organismu a umožňuje její expresi a tvorbu požadovaného produktu.
Rekombinantní molekuly jsou konstruovány za použití restrikčních endonukleáz a DNA ligáz. Požadovaný fragment DNA se oddělí od původního organismu a vloží se do vektoru, aby se vytvořil rekombinan pro transformaci. Řezání požadovaného genu a otevření vektorového organismu by mělo být provedeno pomocí stejného restrikčního enzymu, aby se vytvořily kompatibilní lepivé konce, aby se spojily dohromady. Jakmile je cizí DNA zabudována do vektorového genomu, je známá jako rekombinantní nebo molekula rekombinantní DNA.
Obrázek 02: Rekombinantní DNA
Jaký je rozdíl mezi transformanty a rekombinanty?
Rozdílný článek uprostřed před tabulkou
Transformanti vs rekombinanti |
|
| Transformanty jsou buňky, které mají uvnitř molekulu rekombinantní DNA. | Rekombinanty jsou nosné molekuly, které mají cizí DNA vloženou do vlastního genomu. |
| Exprese cizí DNA | |
| Jsou hostitelskými buňkami, které jsou schopné exprimovat rekombinantní DNA. | Měli by být schopni se replikovat v hostitelském organismu. |
| Výběr | |
| Jako hostitelské buňky jsou vybrány buňky, které lze snadno pěstovat a množit. | Musí být snadno extrahovatelné a měly by obsahovat volitelné značky. |
Shrnutí - Transformanti vs. rekombinanti
Transformanty jsou buňky nebo organismy, v nichž jsou molekuly rekombinantní DNA. Rekombinanty jsou organismy nebo buňky, které prošly genetickou rekombinací a mají ve svých genomech cizí DNA. Bakteriální buňky se často používají jako hostitelské buňky pro transformaci a plazmidy a bakteriofágy se často používají jako vektory v technologii rekombinantní DNA. To je rozdíl mezi transformanty a rekombinanty.
