Rozdíl Mezi Imunocytochemií A Imunohistochemií

2024 Autor: Mildred Bawerman | [email protected]. Naposledy změněno: 2023-12-16 08:37

Klíčový rozdíl - Imunocytochemie vs. Imunohistochemie

Imunocytochemie (ICC) a imunohistochemie (IHC) jsou dvě široce používané techniky v molekulární diagnostice, která identifikuje a potvrzuje výskyt jak nepřenosných nemocí, tak přenosných nemocí na základě molekulárních markerů přítomných na buňkách. Klíčovým rozdílem v imunocytochemii a imunohistochemii je molekula, která se v těchto technikách používá jako analytický postup. V ICC se používají primární a sekundární protilátky konjugované se značkami, jako je fluorescence, zatímco pro diagnostické stanovení se používají IHC, monoklonální a polyklonální protilátky.

OBSAH

1. Přehled a klíčový rozdíl

2. Co je to imunocytochemie

3. Co je to imunohistochemie

4. Podobnosti mezi imunocytochemií a imunohistochemií

5. Porovnání vedle sebe - imunocytochemie vs. imunohistochemie ve formě tabulky

6. Shrnutí

Co je to imunocytochemie (ICC)?

ICC používá primární a sekundární protilátky vázané na markery, jako jsou fluorescenční markery nebo enzymy, a je účinnou detekční metodou pro detekci antigenů přítomných v cílových buňkách, které mohou být buď infekční buněčné částice nebo rakovinné nádorové buňky. Pro imunocytochemii jsou vyžadovány tři typy kontrol.

• Primární protilátka - kontrola, která ukazuje specificitu vazby primární protilátky na antigen
• Sekundární protilátka - kontrola, která ukazuje, že značka je specifická pro primární protilátku
• Ovládací prvky štítku - ukazují, že označení je výsledkem přidaného štítku, nikoli výsledkem endogenního značení.

Obrázek 01: Imunocytochemie označuje jednotlivé proteiny v buňkách (zde jsou tyrosinhydroxyláza v axonech sympatických autonomních neuronů zobrazena zeleně).

Kontrola primární protilátky je specifická pro každou novou protilátku a nelze ji opakovat pro každý experiment. Kontrola sekundárních protilátek je navržena na základě primární protilátky použité v experimentu a je součástí každého experimentu. Ovládací prvek označení je zahrnut, pokud dojde ke změně podmínky postupu, změně vzorku nebo k nalezení neočekávaného označení.

Dvě hlavní aplikace ICC jsou Radio Immuno - Assay (RIA) a Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA). Nejběžnější používanou protilátkou je imunoglobulin G.

Co je to imunohistochemie (IHC)?

V imunohistochemii obsahuje zdrojový vzorek monoklonální a polyklonální protilátky za účelem stanovení přítomnosti antigenu v cizích buňkách. Tato technika je založena na specifické reakci vazby antigen-protilátka. Protilátky použité při detekci mohou být označeny různými markery; mohou to být fluorescenční markery, radioaktivně značené markery nebo chemické markery. Prostřednictvím usnadnění in vitro vazby mezi antigenem a cílenou protilátkou lze určit přítomnost nebo nepřítomnost konkrétního proteinu buňky.

Obrázek 02: Imunohistochemické barvení normální ledviny pomocí CD10

V současné době se vědci podílejí na vývoji cílových protilátek pro specifické antigeny přítomné v buňkách, které se mohou vyvinout jako maligní nádorové buňky nebo antigeny přítomné v infekčních agensech, jako je HIV.

Jaké jsou podobnosti mezi imunocytochemií a imunohistochemií?

• Reakce jsou vysoce specifické a přesné v ICC a IHC.
• Aplikace ICC a IHC zahrnují diagnostiku rakoviny a infekčních nemocí.
• Sterilní podmínky by měly být udržovány za obou podmínek a měly by být prováděny in vitro
• Obě techniky poskytují reprodukovatelné výsledky.
• Oba jsou rychlí.
• Radioaktivní značení, fluorescenční techniky se používají jako detekční metody jak v ICC, tak v IHC.
• Oba jsou založeny na párování antigen-protilátka.

Jaký je rozdíl mezi imunocytochemií a imunohistochemií?

Rozdílný článek uprostřed před tabulkou

Imunocytochemie (ICC) vs Imunohistochemie (IHC)
ICC používá markery vázané na primární a sekundární protilátky, jako jsou fluorescenční markery nebo enzymy, a je účinnou detekční metodou k detekci antigenů přítomných v cílových buňkách.	IHC je metoda, která používá monoklonální a polyklonální protilátky ke stanovení přítomnosti antigenů, což jsou speciální proteinové markery umístěné na buněčných površích.
Ukázkový zdroj
V ICC se používají vzorky pocházející z tkání, které byly histologicky zpracovány na tenké řezy.	IHC používá vzorky sestávající z buněk pěstovaných v monovrstvě nebo buněk v suspenzi, které jsou uloženy na podložním sklíčku.
Zpracování vzorku
V ICC by buňky měly být propustné, aby se usnadnil průnik protilátek k intracelulárním cílům.	V IHC jsou buňky před barvením fixovány formalínem, zalit parafinem.

Shrnutí - Imunocytochemie vs. Imunohistochemie

Molekulární diagnostika se používá k identifikaci a potvrzení výskytu jak nepřenosných nemocí, tak přenosných nemocí na základě molekulárních markerů přítomných v buňkách. Molekulární markery mohou být proteiny nebo sekvence DNA nebo RNA; vývoj technologií, jako jsou ICC a IHC, připravil vědcům cestu k identifikaci nemoci a její příčiny v rané fázi. ICC i IHC závisí na specifických reakcích mezi protilátkou a antigenem, i když je zdrojem vzorku. Hlavním rozdílem mezi imunocytochemií a imunohistochemií je zpracování vzorků těchto dvou postupů.

Stáhnout PDF verzi Imunocytochemistry vs Imunohistochemistry

Můžete si stáhnout verzi tohoto článku ve formátu PDF a použít jej pro offline účely podle citace. Stáhněte si zde PDF verzi. Rozdíl mezi imunocytochemií a imunohistochemií.