Klíčový rozdíl - Imunocytochemie vs. Imunohistochemie
Imunocytochemie (ICC) a imunohistochemie (IHC) jsou dvě široce používané techniky v molekulární diagnostice, která identifikuje a potvrzuje výskyt jak nepřenosných nemocí, tak přenosných nemocí na základě molekulárních markerů přítomných na buňkách. Klíčovým rozdílem v imunocytochemii a imunohistochemii je molekula, která se v těchto technikách používá jako analytický postup. V ICC se používají primární a sekundární protilátky konjugované se značkami, jako je fluorescence, zatímco pro diagnostické stanovení se používají IHC, monoklonální a polyklonální protilátky.
OBSAH
1. Přehled a klíčový rozdíl
2. Co je to imunocytochemie
3. Co je to imunohistochemie
4. Podobnosti mezi imunocytochemií a imunohistochemií
5. Porovnání vedle sebe - imunocytochemie vs. imunohistochemie ve formě tabulky
6. Shrnutí
Co je to imunocytochemie (ICC)?
ICC používá primární a sekundární protilátky vázané na markery, jako jsou fluorescenční markery nebo enzymy, a je účinnou detekční metodou pro detekci antigenů přítomných v cílových buňkách, které mohou být buď infekční buněčné částice nebo rakovinné nádorové buňky. Pro imunocytochemii jsou vyžadovány tři typy kontrol.
- Primární protilátka - kontrola, která ukazuje specificitu vazby primární protilátky na antigen
- Sekundární protilátka - kontrola, která ukazuje, že značka je specifická pro primární protilátku
- Ovládací prvky štítku - ukazují, že označení je výsledkem přidaného štítku, nikoli výsledkem endogenního značení.
Obrázek 01: Imunocytochemie označuje jednotlivé proteiny v buňkách (zde jsou tyrosinhydroxyláza v axonech sympatických autonomních neuronů zobrazena zeleně).
Kontrola primární protilátky je specifická pro každou novou protilátku a nelze ji opakovat pro každý experiment. Kontrola sekundárních protilátek je navržena na základě primární protilátky použité v experimentu a je součástí každého experimentu. Ovládací prvek označení je zahrnut, pokud dojde ke změně podmínky postupu, změně vzorku nebo k nalezení neočekávaného označení.
Dvě hlavní aplikace ICC jsou Radio Immuno - Assay (RIA) a Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA). Nejběžnější používanou protilátkou je imunoglobulin G.
Co je to imunohistochemie (IHC)?
V imunohistochemii obsahuje zdrojový vzorek monoklonální a polyklonální protilátky za účelem stanovení přítomnosti antigenu v cizích buňkách. Tato technika je založena na specifické reakci vazby antigen-protilátka. Protilátky použité při detekci mohou být označeny různými markery; mohou to být fluorescenční markery, radioaktivně značené markery nebo chemické markery. Prostřednictvím usnadnění in vitro vazby mezi antigenem a cílenou protilátkou lze určit přítomnost nebo nepřítomnost konkrétního proteinu buňky.
Obrázek 02: Imunohistochemické barvení normální ledviny pomocí CD10
V současné době se vědci podílejí na vývoji cílových protilátek pro specifické antigeny přítomné v buňkách, které se mohou vyvinout jako maligní nádorové buňky nebo antigeny přítomné v infekčních agensech, jako je HIV.
Jaké jsou podobnosti mezi imunocytochemií a imunohistochemií?
- Reakce jsou vysoce specifické a přesné v ICC a IHC.
- Aplikace ICC a IHC zahrnují diagnostiku rakoviny a infekčních nemocí.
- Sterilní podmínky by měly být udržovány za obou podmínek a měly by být prováděny in vitro
- Obě techniky poskytují reprodukovatelné výsledky.
- Oba jsou rychlí.
- Radioaktivní značení, fluorescenční techniky se používají jako detekční metody jak v ICC, tak v IHC.
- Oba jsou založeny na párování antigen-protilátka.
Jaký je rozdíl mezi imunocytochemií a imunohistochemií?
Rozdílný článek uprostřed před tabulkou
Imunocytochemie (ICC) vs Imunohistochemie (IHC) |
|
| ICC používá markery vázané na primární a sekundární protilátky, jako jsou fluorescenční markery nebo enzymy, a je účinnou detekční metodou k detekci antigenů přítomných v cílových buňkách. | IHC je metoda, která používá monoklonální a polyklonální protilátky ke stanovení přítomnosti antigenů, což jsou speciální proteinové markery umístěné na buněčných površích. |
| Ukázkový zdroj | |
| V ICC se používají vzorky pocházející z tkání, které byly histologicky zpracovány na tenké řezy. | IHC používá vzorky sestávající z buněk pěstovaných v monovrstvě nebo buněk v suspenzi, které jsou uloženy na podložním sklíčku. |
| Zpracování vzorku | |
| V ICC by buňky měly být propustné, aby se usnadnil průnik protilátek k intracelulárním cílům. | V IHC jsou buňky před barvením fixovány formalínem, zalit parafinem. |
Shrnutí - Imunocytochemie vs. Imunohistochemie
Molekulární diagnostika se používá k identifikaci a potvrzení výskytu jak nepřenosných nemocí, tak přenosných nemocí na základě molekulárních markerů přítomných v buňkách. Molekulární markery mohou být proteiny nebo sekvence DNA nebo RNA; vývoj technologií, jako jsou ICC a IHC, připravil vědcům cestu k identifikaci nemoci a její příčiny v rané fázi. ICC i IHC závisí na specifických reakcích mezi protilátkou a antigenem, i když je zdrojem vzorku. Hlavním rozdílem mezi imunocytochemií a imunohistochemií je zpracování vzorků těchto dvou postupů.
Stáhnout PDF verzi Imunocytochemistry vs Imunohistochemistry
Můžete si stáhnout verzi tohoto článku ve formátu PDF a použít jej pro offline účely podle citace. Stáhněte si zde PDF verzi. Rozdíl mezi imunocytochemií a imunohistochemií.
