Klíčový rozdíl - RPMI vs DMEM
Většina výzkumných studií zahrnuje kultivaci zvířecích buněk, a proto tyto studie vyžadují údržbu zvířecích buněčných linií za zvláštních růstových podmínek. Kultivace živočišných buněk se široce provádí ve farmakologických studiích za účelem identifikace metabolismu léčiv, v diagnostice onemocnění a ve výzkumu rakoviny. Médium pro buněčnou kulturu je důležitým aspektem buněčné kultury zvířat. Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) a Roswell Park Memorial Institute Medium (RPMI) jsou dvě kultivační média používaná při kultivaci zvířecích buněk. RPMI je médium široce používané pro kultivaci savčích buněk v suspenzní kultuře. DMEM je modifikovaný typ bazálního média se zvýšenou koncentrací aminokyselin a vitamínů až čtyřnásobně. DMEM se používá při kultivaci buněk v adherujících kulturách. Klíčovým rozdílem mezi těmito dvěma médii je typ kultury média. RPMI se používá na suspenzních kulturách, zatímco DMEM se používá ke kultivaci adherentních buněk.
OBSAH
1. Přehled a klíčový rozdíl
2. Co je RPMI
3. Co je DMEM
4. Podobnosti mezi RPMI a DMEM
5. Porovnání vedle sebe - RPMI vs. DMEM ve formě tabulky
6. Shrnutí
Co je RPMI?
RPMI nebo Roswell Park Memorial Institute Medium se také označuje jako RPMI 1640. Název média byl odvozen institutem, ve kterém byla média objevena. Toto médium se běžně používá v buněčné kultuře zvířat, zejména pro růst buněk savců. Původně byly vyvinuty k pěstování lidských lymfocytů.
Následující přísady jsou zahrnuty v RPMI.
- Glukóza
- indikátor pH (fenolová červeň)
- Soli (chlorid sodný, hydrogenuhličitan sodný, fosforečnan sodný, chlorid draselný, síran hořečnatý a dusičnan vápenatý)
- Aminokyseliny
- Vitamíny (i-inositol, cholinchlorid, kyselina para-aminobenzoová, kyselina listová, nikotinamid, pyridoxin-hydrochlorid, thiamin-hydrochlorid, pantothenát vápenatý, biotin a riboflavin, kyanokobalamin)
Zvláštností RPMI je zvýšená koncentrace fosfátu v médiu. RPMI se používá v atmosféře 5% oxidu uhličitého. To zajistí maximální a optimální podmínky pro růst buněk. PH média se udržuje na 8,0 systémem pufru hydrogenuhličitanu.
Obrázek 01: Buněčná kultura na Petriho misce
Aplikace RPMI v kultivaci buněk
- Kultivace lidských T a B lymfocytů, buněk kostní dřeně a hybridomu.
- Používá se ke studiu lidských neoplastických buněk.
Co je DMEM?
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) je modifikované médium, které je komerčně připraveno. Původní struktura středního prášku je žlutá. V DMEM se koncentrace vitamínů zvyšuje až čtyřnásobně, čímž se zvyšuje obsah živin v médiu.
DMEM je také modifikován přidáním více solí, jako je dusičnan železitý, pyruvát sodný a některé neesenciální aminokyseliny, jako je serin a glycin. Rovněž se mění složení glukózy v médiu. Původní formulace se skládá z 1 000 mg / l glukózy, zatímco v DMEM se koncentrace zvyšuje až na 4 500 mg / l. DMEM také vyžaduje doplnění sérového média, protože to není úplné médium. Nejčastěji je DMEM doplněn fetálním bovinním sérem (FBS). FBS poskytuje požadované proteiny a růstové faktory pro proces kultivace.
PH média se mění po přidání hydrogenuhličitanu sodného. pH média před přidáním hydrogenuhličitanu sodného je přibližně 6,80 - 7,40, zatímco pH po přidání hydrogenuhličitanu sodného se pohybuje v rozmezí 7,60 - 8,20. Skladovací teplota média je 2 - 8 0 C.
Obrázek 02: DMEM
Aplikace DMEM
- Studovat schopnost polyomaviru v myších embryonálních buňkách vytvářet plak.
- Ve studiích kontaktní inhibice.
- Ve výzkumu a analýze kuřecích buněčných kultur.
Jaké jsou podobnosti mezi RPMI a DMEM?
- Jak RPMI, tak DMEM se používají v kultivaci zvířecích buněk.
- Média RPMI i DMEM jsou kapalné formulace.
- Média RPMI i DMEM obsahují esenciální aminokyseliny, vitamíny a anorganické soli potřebné pro růst.
- Média RPMI i DMEM jsou neúplná. Proto by mělo být přidáno sérum.
- Média RPMI i DMEM používají jako zdroj uhlíku glukózu.
- Média RPMI i DMEM mají vyšší pH.
Jaký je rozdíl mezi RPMI a DMEM?
Rozdílný článek uprostřed před tabulkou
RPMI vs DMEM |
|
| RPMI je médium široce používané pro kultivaci savčích buněk v suspenzní kultuře. | DMEM je modifikovaný typ bazálního média se zvýšenou koncentrací aminokyselin a vitamínů. |
| Přítomnost extra fosfátů | |
| Prezentováno v RPMI. | Nepřítomen v DMEM. |
| Použití | |
|
Používá se ke kultivaci buněk v adherentních kulturách. Je zvyklý,
|
| Druhy kultury | |
| RPMI se používá pro suspenzní kultury. | DMEM se používá pro kultury s adherovanými buňkami. |
Shrnutí - RPMI vs DMEM
Jak RPMI, tak DMEM jsou široce používány při kultivaci zvířecích buněk, zejména pro kultivaci zvířecích buněčných linií včetně lymfocytů in vitro. DMEM je modifikované bazální médium, kde dochází ke zvýšené koncentraci živin. RPMI vyvinutý Roswell Park Memorial Institute a je také médiem používaným při kultivaci zvířecích buněk, zejména pro savčí lymfocyty. Obě média jsou komerčně dostupná. To je rozdíl mezi RPMI a DMEM.
