Klíčový rozdíl - HPLC vs. LCMS
Před analýzou rozdílu mezi HPLC a LCMS se nejprve podívejme na význam HPLC a LCMS. Chromatografie je separační technika v chemické analýze, kde se složky vzorku oddělují během průchodu chromatografickým médiem. Zahrnuje také interakci se vzorkem, stacionární fází a mobilní fází. HPLC znamená High Performance Liquid Chromatography a používá se jako metoda kapalinové chromatografie v analytické chemii. Kombinace kapalinové chromatografie a hmotnostní spektroskopie (LCMS) byla vyvinuta pro kvantitativní analýzu vybraných biomolekul a je vysoce citlivým, přesným a specifickým testovacím postupem ve srovnání s HPLC. To je klíčový rozdíl mezi HPLC a LCMC. Tento článek vám představí HPLC a LCMC, které se zabývají chemickou analýzou a diskutují rozdíly mezi HPLC a LCMS.
Co je to HPLC?
Vysoce účinná kapalinová chromatografie (HPLC) je populární separační technikou v analytické chemii. Používá se hlavně k oddělení složek, k identifikaci a kvantifikaci každé složky ve směsi. Dříve byla tato metoda známá jako vysokotlaká kapalinová chromatografie, protože závisela na pumpách, aby protékaly tlakovým kapalným rozpouštědlem obsahujícím směs vzorku přes kolonu naplněnou pevným adsorpčním materiálem. Každá složka ve směsi vzorku interaguje odlišně s pevným adsorpčním materiálem, což má za následek různé rychlosti toku pro různé složky. To může vést k oddělení složek, které vytekají z HPLC kolony.
HPLC se používá pro různé aplikace, jako je analýza hladin vitaminu D v krvi, nelegální užívání drog sportovci detekcí zbytků léků v moči, třídění složek komplexního biologického vzorku pro výzkumné účely a analýza a výroba léčiv.
Co je LCMS?
Liquid chromatografie – hmotnostní spektrometrie (LCMS) je analytická technika, která kombinuje schopnosti fyzikální separace kapalinové chromatografie se schopnostmi hmotnostní analýzy hmotnostní spektrometrie (MS). Kapalinová chromatografie je separační technika a hmotnostní spektrometrie se používá k analýze poměru hmotnost k náboji nabitých částic. Fyzikální separace se obvykle dosahuje pomocí HPLC a alternativně LCMS známého také jako HPLC-MS. LCMS je dominantní analytická technika, která má ve srovnání s HPLC velmi vysokou přesnost, citlivost a specificitu. Proto je užitečný v mnoha aplikacích, jako jsou výzkumné účely, analýza léků, analýza potravin atd. LCMS se používá hlavně k oddělení, detekci, identifikaci a kvantifikaci biochemických vlastností konkrétního vzorku v přítomnosti komplexních chemických směsí.
Jaký je rozdíl mezi HPLC a LCMC?
Zkratka a definice HPLC a LCMC
HPLC: HPLC znamená vysoce výkonnou kapalinovou chromatografii. Jedná se o separační techniku, která se používá hlavně k oddělení složek, k identifikaci a kvantifikaci každé složky ve směsi.
LCMS: LCMS znamená kapalinová chromatografie a hmotnostní spektrometrie. Jedná se o analytickou techniku, která kombinuje schopnosti fyzikální separace kapalinové chromatografie se schopnostmi hmotnostní analýzy hmotnostní spektrometrie (MS).
Charakteristiky HPLC a LCMC
Klasifikace
HPLC: Toto je pouze metoda kapalinové chromatografie.
LCMS: Jedná se o kombinaci metody kapalinové chromatografie a metody hmotnostní spektrometrie.
Účinnost
HPLC: Ve srovnání s LCMS je HPLC analýza méně účinná a pomalejší.
LCMS: Ve srovnání s HPLC je analýza LCMS efektivní a rychlejší.
Citlivost
HPLC: Ve srovnání s LCMS je HPLC analýza méně citlivá.
LCMS: Ve srovnání s HPLC je LCMS analýza citlivější.
Specifičnost
HPLC: Ve srovnání s LCMS je HPLC analýza méně specifická.
LCMS: Ve srovnání s HPLC je analýza LCMS konkrétnější.
Přesnost
HPLC: HPLC poskytuje méně přesné výsledky než LCMS pro stanovení některých chemikálií.
LCMS: LCMS poskytuje přesnější výsledky pro stanovení některých chemikálií než HPLC.
Komponent
HPLC: HPLC lze považovat za součást LCMS.
LCMS: LCMS nelze považovat za složku HPLC.
Ionový zdroj
HPLC: Zdroj iontů v přístroji HPLC neexistuje.
LCMS: Zdroj iontů je přítomen v přístroji LCMS.
Aplikace
HPLC: Iony, polymery, organické molekuly a biomolekuly lze analyzovat pomocí HPLC.
LCMS: Mohou být analyzovány organické molekuly a biomolekuly. Na rozdíl od HPLC lze LCMS použít ke zkoumání neúplně vyřešených směsí.
Úkon
HPLC: Schéma nástroje pro HPLC je uvedeno na obrázku 1 a obvykle zahrnuje autosampler, pumpy a detektor. Vzorkovač zavádí směs vzorku do mobilní fáze (tlaková směs rozpouštědel, jako je voda, acetonitril a / nebo methanol), která ji přenáší do kolony. Čerpadla dodávají koloně požadovaný tok a složení mobilní fáze. Kolona je naplněna adsorbentem, kterým jsou zrnité pevné částice, jako je oxid křemičitý nebo polymery. Detektor produkuje signál úměrný množství přítomných složek vzorku ve sloupci, což umožňuje kvantifikovatelnou analýzu vybraných složek vzorku. Přístroj HPLC je řízen a analýza dat je zajištěna digitálním mikroprocesorem a uživatelským softwarem.
Obrázek 1: Schéma HPLC přístroje
LCMS: Schéma přístroje LCMS je uvedeno na obrázku 2. Extrakt vzorku se vloží do kolony sestávající z HPLC. Tento sloupec obsahuje vzorky metabolitů na základě fyzikálních znaků a různé metabolity proudí do hmotnostního spektrometru v různých časových intervalech. Hmotnostní spektroskopie se používá pro hodnocení hmotností částic, pro určení elementárního uspořádání molekuly a pro objasnění struktur molekul. Vzorek by však měl být ionizován, aby generoval nabité molekuly, aby se určily jejich poměry hmotnosti k náboji. Proto místo nástrojů pro HPLC sestává LCMS z dalších tří modulů, jako je zdroj železa, hmotnostní analyzátor a detektor. Zdroj iontů může transformovat vzorek plynné fáze na ionty a hmotnostní analyzátor seskupující ionty podle jejich hmot pomocí elektromagnetických polí. Konečně,detektor kvantifikuje hodnoty a dodává data každého iontu přítomného ve vzorku. Techniku LCMS lze použít pro kvalitativní i kvantitativní aplikace.
Obrázek 2: Schéma přístroje LCMS
Závěrem lze říci, že HPLC je metoda kapalinové chromatografie, zatímco LCMS je kombinace kapalinové chromatografie a hmotnostní spektrometrie. Obě tyto analytické techniky mají různé vlastnosti, ale lze je použít k identifikaci a kvantifikaci složení potravin, léčiv a dalších bioaktivních molekul.
