Rozdíl Mezi CFU A MPN

2024 Autor: Mildred Bawerman | [email protected]. Naposledy změněno: 2023-12-16 08:37

Klíčový rozdíl - CFU vs. MPN

Jednotka tvořící kolonie (CFU) a nejpravděpodobnější počet (MPN) jsou dvě metody používané k výpočtu mikroorganismů ve vzorcích. Oba parametry se používají k detekci kvality vody a bakterií fekálního indikátoru ve vzorcích vody. Jednotka tvořící kolonie je míra používaná k výčtu počtu životaschopných bakteriálních buněk nebo buněk hub ve specifickém objemu nebo hmotnosti daného vzorku. Standardní jednotka pro tento parametr je CFU / ml nebo CFU / g. Nejpravděpodobnějším číslem je další jednotka používaná k měření počtu životaschopných bakteriálních buněk v kapalném vzorku. Klíčový rozdíl mezi CFU a MPN spočívá v tom, že CFU se počítá z bakteriálních a plísňových kolonií rostoucích na pevné agarové plotně, zatímco MPN se počítá ze životaschopných bakterií rostoucích v kapalném médiu.

OBSAH

1. Přehled a klíčový rozdíl

2. Co je CFU

3. Co je MPN

4. Porovnání vedle sebe - CFU vs. MPN ve formě tabulky

5. Shrnutí

Co je CFU?

Jednotka tvořící kolonie (CFU) je parametr, který měří počet životaschopných bakteriálních nebo houbových buněk v daném vzorku. Metoda, která počítá jednotky tvořící kolonie, se označuje jako standardní počet destiček. Životaschopné kolonie, které se objevují na agarových plotnách, jsou vyjádřeny jako CFU na 1 ml (jednotka tvořící kolonie na mililiter) vzorku pro kapaliny nebo CFU na 1 g (jednotka tvořící kolonie na jeden gram) vzorku pro pevné látky.

K měření CFU ve vzorku se používají dvě běžné metody. Jsou to metoda roztažené desky a metoda vylévané desky. Tyto dvě metody jsou podporovány technikou zvanou sériové ředění. Sériově naředěné vzorky umožňují získat spočítatelné množství kolonií na povrchu agaru. Známý objem vzorku lze rozložit na povrch agarové destičky nebo smíchat s agarem a nalít na misku. Destička se poté inkubuje a vznikající kolonie se spočítají. Počet kolonií souvisí s počtem mikroorganismů v původním vzorku. Destičky, které ukazují příliš mnoho kolonií nebo příliš málo kolonií, jsou z počítání vyloučeny, protože výsledky nemusí být statisticky přesné na těchto destičkách. Statisticky je nejlepší rozsah 30 - 300 kolonií na agarové plotně. Správné desky by proto měly být vybrány pro přesný výčet. U výše uvedené funkce se provádí sériové ředění.

Jakmile spočítáte počet životaschopných kolonií na destičkách, lze CFU / ml vypočítat pomocí následující rovnice.

CFU na ml původního vzorku = počet kolonií na desce X ředicí faktor

Faktor ředění = (1 / Ředění destičky)

Pokud například na desce ^10–4 ředění dostanete 149 kolonií, lze počet bakterií v 1 ml původního vzorku vypočítat takto:

CFU / ml = (149) x (1/10 ^-4)

= 149 × 10 ⁴ nebo 1490000

= 1,49 x 10 ⁶

Obrázek 01: Jednotka tvořící kolonie

Co je MPN?

Nejpravděpodobnějším číslem je alternativní opatření k CFU / ml. MPN také odhaduje životaschopné buňky v kapalném vzorku. Počítá organismy rostoucí v kapalné kultuře a je to převážně bakteriologická technika. Tato metoda je zvláště užitečná pro vzorky, které obsahují nízké koncentrace bakteriálních buněk; například mléko, pitná voda atd. Hodnota MPN se vyjadřuje pro 100 ml objemu. MPN se opírá o statistickou metodu založenou na teorii pravděpodobnosti. Existují statistické tabulky navržené k nalezení hodnot MPN na 100 ml vzorku. Tyto tabulky ukazují výsledky při 95% mezích spolehlivosti.

Hodnota MPN se vypočítá po provedení techniky zvané metoda zkumavky s více zkumavkami. Tři sady zkumavek obsahujících vhodné kultivační médium se naočkují třemi různými objemy vzorku, jako je 10 ml, 1 ml a 0,1 ml, a inkubují se pro růst. Po inkubační době jsou zkumavky hodnoceny + (pozitivní) nebo - (negativní) z hlediska přítomnosti nebo nepřítomnosti růstu. Vzor pozitivních a negativních výsledků se poté porovná s tabulkou statistických pravděpodobností MPN, aby se odhadl počet mikroorganismů. Poté je uvedena hodnota MPN pro 100 ml vzorku. MPN se široce používá k detekci koliformních bakterií přítomných ve vzorcích vody.

Obrázek 02: Tabulka MPN

Jaký je rozdíl mezi CFU a MPN?

Rozdílný článek uprostřed před tabulkou

CFU vs MPN
CFU je míra používaná k vyjádření počtu životaschopných bakteriálních nebo houbových kolonií v daném vzorku.	MPN je alternativním opatřením k CFU a měří počet životaschopných bakteriálních buněk v kapalném vzorku.
Jednotka
CFU / ml nebo CFU / g	MPN / 100 ml
Výpočet
CFU se vypočítá spočítáním počtu kolonií vypěstovaných na agarových plotnách.	MPN se vypočítá porovnáním pozitivních a negativních vzorců zkumavek se statistickou tabulkou MPN.
Technika sériového ředění
Sériové ředění se provádí před umístěním vzorků na agarové plotny.	Sériové ředění se při výpočtu MPN obvykle neprovádí
Metody
Metoda rozprostření desky a metoda vylévání desky jsou dva typy metod prováděných k získání CFU.	Metoda provádějící k získání hodnoty MPN je vícenásobná zkumavka.

Shrnutí - CFU vs MPN

Měření mikrobiálního růstu je nutné z mnoha důvodů. V potravinářských provozech je nutné měřit hladinu a typ mikroorganismů v potravinách. V potravinářském průmyslu a medicíně je nutné zajistit, aby byly sterilizační postupy účinně aplikovány. V čistírnách odpadních vod je nutné pravidelně počítat mikroby. Při optimalizaci postupu v molekulární biologii je nutné měřit počet kolonií na destičkách. Proto jsou k dispozici různé metody výčtu a měření růstu. CFU a MPN jsou dvě takové metody široce přijímané v různých oblastech. CFU je měřítkem počtu životaschopných bakteriálních a houbových kolonií přítomných v daném vzorku. Vypočítává se pomocí standardní metody počítání destiček nebo životaschopné metody počítání destiček. MPN je další měřítko, které vyjadřuje počet bakteriálních buněk přítomných v daném objemu kapalného vzorku. Vypočítává se pomocí metody vícekanálové fermentace a tabulky MPN. To je rozdíl mezi CFU a MPN.