Klíčový rozdíl - Gram Stain proti kultuře
Gramovo barvení je barvicí technika, která se provádí k rozlišení bakterií do dvou skupin podle tloušťky vrstvy peptidoglykanu v jejich buněčné stěně. Kultura je metoda pěstování a udržování mikroorganismů v laboratorních podmínkách pro různé analýzy. Klíčovým rozdílem mezi gramovou barvou a kulturou je jejich funkce; Gram kmen barvicí technika bakterií, kde kultura je metoda pěstování a udržování mikroorganismů.
OBSAH
1. Přehled a klíčový rozdíl
2. Co je Gram Stain
3. Co je kultura
4. Porovnání vedle sebe - Gram Stain oproti kultuře
5. Shrnutí
Co je Gram Stain?
Gramovo barvení je důležitá technika diferenciálního barvení používaná pro bakteriální identifikaci v mikrobiologii. Tuto techniku zavedl dánský bakteriolog Hans Christian Gram v roce 1884. Gramovo barvení kategorizuje bakterie do dvou hlavních skupin: gram pozitivní a gram negativní; tito jsou velmi důležití v bakteriální klasifikaci a identifikaci. Gramovo barvení se provádí jako počáteční krok pro bakteriální charakterizaci.
Bakterie jsou seskupeny podle rozdílů v jejich buněčné stěně. Grampozitivní bakterie obsahují ve své buněčné stěně silnou vrstvu peptidoglykanu, zatímco gramnegativní bakterie obsahují ve své buněčné stěně tenkou vrstvu peptidoglykanu, jak je znázorněno na obrázku 01. Výsledek gramobarvení bude založen na rozdílu tloušťky peptidoglykanové vrstvy buněčná stěna.
Obrázek 1: Gram pozitivní bakterie a Gram negativní bakterie
Gramovo barvení se provádí za použití čtyř různých činidel, jmenovitě; primární skvrna, mořidlo, odbarvovací prostředek a protizápachová skvrna. Krystalová violeť a safranin slouží jako primární a proti skvrny, zatímco gramy jódu a 95% alkoholu slouží jako mořidlo a odbarvovač.
Základní kroky barvení gramů
- Bakteriální nátěr se připraví na čistém sklíčku, zafixuje se a ochladí.
- Roztěr je zaplaven krystalickou fialovou po dobu 1 - 2 minut.
- Stěr se opláchne pomalu tekoucí vodou z vodovodu, aby se odstranily přebytečné skvrny.
- Gramy jódu se nanáší na nátěr po dobu 1 minuty.
- Nátěr se opláchne pomalu tekoucí vodou z vodovodu
- Roztěr se promyje 95% alkoholem po dobu 2 - 5 sekund a opláchne se pomalu tekoucí vodou z vodovodu.
- Roztěr se 1 minutu obarví safraninem
- Roztěr se opláchne pomalu tekoucí vodou z vodovodu, vysuší se a pozoruje se pod mikroskopem.
Na konci gramového barvení budou gramnegativní bakterie pozorovány v růžové barvě, zatímco grampozitivní bakterie budou pozorovány ve fialové barvě, jak je znázorněno na obrázku 02. O výsledku gramového barvení rozhodne tloušťka vrstvy peptidoglykanu v jejich buněčná stěna. Během kroku odbarvení se primární barvivo a mořidlo snadno odstraní z gramnegativních bakterií a stanou se bezbarvé, protože mají tenkou vrstvu peptidoglykanu. Primární skvrna je zachována v gramech pozitivních bakterií, protože mají silnou vrstvu peptidoglykanu. Počítadlo skvrn nebude účinné pro grampozitivní bakterie kvůli retenci primárního skvrn. Takže grampozitivní bakterie budou viditelné v primární barvě skvrn, tj. Fialové barvě. Počítadlo skvrn obarví gramnegativní bakterie a bude viditelné v pick color, což je safraninová barva. Proto je snadné rozdělit bakterie do dvou skupin podle gramového barvení a je cenné při diferenciaci a identifikaci bakterií.
Obrázek 2: Gram Strain
Co je to kultura?
Mikrobiální kultura je metoda kultivace a udržování mikroorganismů v laboratorních podmínkách pro různé účely. Kultury se pěstují v pevných, polotuhých a kapalných médiích na základě typu a účelu kultivace mikroorganismů. Kulturám jsou poskytovány nezbytné živiny a růstové podmínky vyžadované mikroorganismy. Existují různé složky kultivačního média, jako je zdroj energie, zdroj uhlíku, zdroj dusíku, minerály, mikroživiny, voda, tuhnoucí činidlo atd. Optimální teplota, kyslík a pH by měly být upraveny podle typu pěstovaného mikroorganismu.
Existují různé typy mikrobiálních kultur; například dávková kultura, kontinuální kultura, bodná kultura, kultivace na agarové plotně, kultivační půda atd. Podle složení růstového média existují různé typy kultivačních médií známých jako syntetická média, polosyntetická média a přírodní média. Mikrobiální kultury se připravují za sterilních podmínek ve speciální komoře zvané laminární proudění vzduchu. Pěstovací médium a sklo se sterilizují před naočkováním požadovaného mikroorganismu. Za správných sterilních podmínek se cílový mikroorganismus přenese do sterilizovaného živného média a inkubuje se při optimální teplotě. Uvnitř média bude mikroorganismus růst a množit se pomocí poskytnutých živin.
Obrázek 3: Bakteriální kultura na desce
Jaký je rozdíl mezi Gram Stain a Culture?
Rozdílný článek uprostřed před tabulkou
Gram Stain proti kultuře |
|
| Gramův kmen je technika diferenciálního barvení používaná pro bakteriální diferenciaci a identifikaci. | Mikrobiální kultura je metoda pěstování mikroorganismů v laboratoři. |
| Součásti | |
| K tomu se používají různá činidla, včetně dvou skvrn. | Používá se různá kultivační média, jako jsou pevná, polotuhá a kapalná média složená z živin a dalších nezbytných podmínek. |
| Základní funkce | |
| To umožňuje seskupení bakterií do dvou skupin: gram negativní a gram pozitivní. | To umožňuje množení mikroorganismů pro různé účely. |
| Základna | |
| Výsledek Gramova barvení je založen na rozdílech v peptidoglykanové vrstvě buněčné stěny. | Mikroorganismy budou růst a množit se uvnitř kultivačního média. |
| Výsledek | |
| Gram negativní bakterie jsou viditelné v růžové barvě a gram pozitivní bakterie jsou viditelné ve fialové barvě. | Na destičkách lze vidět kolonie mikroorganismů. Na kapalných médiích jsou mikroorganismy v suspendované formě. |
Shrnutí - Gram Stain proti kultuře
Mikrobiální kultury se připravují a udržují v laboratorních podmínkách pro různé účely, jako je skladování, testování, chemické čištění atd. Gramovo barvení je postup barvení, který rozlišuje bakterie na dvě hlavní skupiny, které se nazývají gramnegativní bakterie a grampozitivní bakterie. Rozdíl mezi gramovým barvením a kulturou je tedy v tom, že gramové barvení je barvicí technikou bakterií, zatímco kultivace je metodou pěstování a udržování mikroorganismů v laboratořích.
